產品簡介:
蘇mu素(Hematoxylin)和伊紅(Eosin)聯合染色,簡稱 HE 染色,是病理學常規(guī)制片中最基本的染色方法,應用極其廣泛。蘇木精是從原產中南美的洋蘇木中提取出來的淺黃褐色的結晶,是一種堿性染色劑,它在被氧化后生成蘇木素,同媒染劑(常用的是三價的鋁或鹽鐵)一起使用,能夠使細胞核染色。在病理診斷、教學和科研工作中,常用 HE 染色對正常組織和病變組織進行形態(tài)結構觀察。對于確定或鑒別病變組織、細胞中出現的某些異常物質與特殊成分,而需要采用的特殊染色方法、酶組織化學方法、免疫組織化學方法等也均是在觀察HE 染色組織切片的基礎上進行的。在 HE 染色的組織切片中,細胞核呈藍色,細胞漿呈紅色,二者形成鮮明的對比,易于觀察分析。
NobleRyder蘇mu素伊紅染色液中,蘇mu素染色液采用NobleRyder自主研發(fā)的配方,由進口的高純度蘇木精、氧化劑等組成,不含氧化gong、甲醇等有害物質,對細胞核染色效果好。其特點是不易產生沉淀和金屬;應用范圍廣,可以用于人、動物、畜牧、水產等領域,可以用于組織石蠟切片、冰凍切片和組織細胞的染色等;蘇mu素染色液可以重復使用。
NobleRyder蘇mu素伊紅(HE)染色液 即用型液體試劑
染色原理:
1、 細胞核染色的原理:
蘇木素為堿性天然染料,可使細胞核著色。細胞核內染色質的成分主要是 DNA,在 DNA雙螺旋結構中,兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外,使 DNA 雙螺旋的外側帶負電荷,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木素堿性染料以離子鍵或氫鍵結合而被染色。蘇木素在堿性溶液中呈藍色,所以細胞核被染成藍色。
2、 細胞漿染色的原理:
伊紅是一種化學合成的酸性染料,在一定條件下可使細胞漿著色。細胞漿的主要成分是蛋白質,為兩性化合物,細胞漿的染色與染液的 pH 值密切相關。當染色液 pH 值在胞漿蛋白質等電點(4.7~5.0)以下時,胞漿蛋白質以堿式電離,則細胞漿帶正電荷,就可被帶負電荷的酸性染料染色。伊紅在水中離解成帶負電荷的陰離子,與胞漿蛋白質帶正電荷的陽離子結合,使細胞漿著色,呈現紅色。
3、 分化作用:
染色后,用某些特定的溶液將組織過多結合的染色劑脫去,這個過程稱為分化作用,所用的溶液稱為分化液。在 HE 染色中常用 1%鹽酸乙醇作為分化液,因酸能破壞蘇木素的醌型結構,使組織與色素分離而退色。大多數組織經蘇mu素染色后,必須用 1%鹽酸乙醇分化,使細胞核過多結合的蘇木素染料和細胞漿吸附的蘇mu素染料脫去,再進行伊紅染色,才能保證細胞核與細胞漿染色的分明。
4、 返藍作用:
分化之后,蘇木素在酸性條件下處于紅色離子狀態(tài),呈紅色;在堿性條件下處于藍色離子狀態(tài),呈藍色。組織切片經酸性乙醇分化后呈紅色或粉紅色,立即用水除去組織切片上的酸而中止分化,再用弱堿性水使蘇木素染上的細胞核呈現藍色,這個過程稱為返藍作用或藍化作用。另外用自來水浸洗也可使細胞核返藍,但所需時間較長。
產品組成:
編號 名稱 | D5806 | D5806 | Storage |
試劑(A): NobleRyder蘇mu素染色液 | 100ml | 500ml | RT避光 |
試劑(B):伊紅染色液 | 100ml | 500ml | RT避光 |
使用說明書 | 1份 |
自備材料:
1、鹽酸乙醇分化液
2、藍化液,如稀氨水、碳酸li溶液等
3、系列乙醇
4、4%多聚甲quan
操作步驟(僅供參考):
(一) 石蠟切片染色
1、 切片脫蠟至水
① 二甲苯作用 2 次,每次 5~10min。
② (可選)無水乙醇作用 2 次,每次 3~5min。
③ 95%的乙醇 3~5min
④ 90%的乙醇 3~5min
⑤ 80%的乙醇 3~5min
⑥ 自來水或蒸餾水沖洗 1~3min
2、 染色
① NobleRyder 蘇mu素染色液染色 5~8min
② 自來水或蒸餾水沖洗 5~10s
③ (可選)鹽酸乙醇分化 2~5s
④ 自來水沖洗 20~30s
⑤ 藍化液返藍 20~40s
⑥ 自來水沖洗 30~60s
⑦ 伊紅染色液染色 3~5min
⑧ 自來水沖洗 1~5s
2、 脫水、透明、封固
① 80%乙醇 10~20s
② 90%乙醇 10~20s
③ 95%乙醇作用 2 次,每次 1~2min。
④ 無水乙醇作用 2 次,每次 2~3min。
⑤ 二甲苯透明 3 次,每次 2~3min。
⑥ 中性樹脂封片。
染色結果:細胞核呈藍色;細胞質、肌纖維、膠原纖維、甲狀腺膠質等呈深淺不一的紅色;角蛋白、紅細胞等呈明亮的橙紅色。
(二) 冰凍切片染色
1、乙mi-乙醇混合固定液 5~10s
2、自來水沖洗 2~5s
3、NobleRyder 蘇mu素染色液滴染1~2min(可加熱至50℃)。
4、自來水沖洗 2~5s
5、(可選)鹽酸乙醇分化 2~5s
6、自來水沖洗 2~5s
7、藍化液返藍 2~5s
8、自來水沖洗 5~10s
9、伊紅染色液染色 2~5s
10、自來水沖洗 1~2s
11、80%的乙醇 1~2s
12、95%的乙醇 1~2s
13、無水乙醇 2~5s
14、苯fen二甲苯(1:3) 2~5s
15、二甲苯透明 3 次,每次 2~5s。
16、中性樹脂封片
備選方案:
1、 無需脫蠟,直接迅速用蒸餾水沖洗 2~3min.
2、 染色、脫蠟、透明、封固步驟同石蠟切片的染色步驟。
染色結果:細胞核呈藍色;細胞質、纖維呈紅色。
(三)細胞染色
1、4%多聚甲醛固定 10~20min。
2、自來水沖洗 2 次,每次 2min。
3、蒸餾水沖洗 2 次,每次 2min。
4、染色、脫蠟、透明、封固步驟同石蠟切片的染色步驟,作用時間應相應縮短。
染色結果:細胞核呈藍色;細胞質、纖維呈紅色。
注意事項:
1、 切片脫蠟應盡量干凈。系列乙醇應經常更換新液。
2、 鹽酸乙醇分化時間應根據切片厚薄、組織類別以及新舊而定,另外分化后自來水沖洗時間應該足夠,以便徹di清洗酸。
3、 乙mi-乙醇混合固定液是由乙mi和95%乙醇等量混合而得,再加入適量乙酸,密閉保存。
4、 冷凍切片染色時間盡量要短。
5、 藍化液常使用 0.2~1%氨水或 Scott 促藍液或 0.1~1%碳酸li溶液。
6、 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
有效期:12個月有效。
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